引言
免疫組化除用于甲狀腺乳頭狀癌的確診及其他原發腫瘤的鑒別外，還可用于其他腫瘤轉移至甲狀腺時候的鑒別，且在相關機制等研究中具有重要意義。
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鑒別甲狀腺內的繼發性腫瘤
可轉移至甲狀腺的腫瘤類型中，常見的有腎細胞癌、肺癌、乳腺癌、胃癌、黑色素瘤；頭頸部及食管的癌則可直接侵及甲狀腺。有時候在粗針穿刺活檢標本或細針抽吸標本中很難鑒別甲狀腺乳頭狀癌與上述情況；此時必須結合臨床情況，并加做免疫組化以證實或排除相關可能。
轉移至甲狀腺的腎細胞癌中，最常見為透明細胞亞型；其特征性的表現為透明細胞和豐富的血管網，有經驗的病理醫師即使在轉移的部位也可相對容易的做出判定。常用于確定是腎細胞癌的免疫組化標記有CD10、CA-IX，且甲狀腺濾泡標記（如TTF-1）陰性。
需注意和甲狀腺原發腫瘤鑒別的頭頸部癌及部分轉移性食管癌多為鱗狀細胞癌，組織學上的典型鱗狀形態及免疫組化表達p63、p40、CK5/6可證實為鱗狀分化。不過，甲狀腺乳頭狀癌也可有鱗狀化生、或去分化為伴鱗狀分化的間變性癌。這種情況下注意，免疫組化PAX-8和TTF-1在間變性甲狀腺癌可為陽性，而在頭頸部（包括食管）鱗癌多為陰性。
轉移性惡性黑色素瘤在組織學上可類似其他癌的情況，早已眾所周知。不過，黑素細胞相關標記的陽性（如SOX-10、Melan A【也稱為MART-1】）可以很容易的做出鑒別。胃或食管的腺癌、乳腺癌也可通過免疫組化和甲狀腺乳頭狀癌鑒別開：胃或食管的腺癌多表達CDX2，乳腺癌則表達GATA-3。肺腺癌也常見轉移至甲狀腺，此時需要注意的是，TTF-1和napsin A在肺腺癌和甲狀腺癌都可能是陽性，因此需注意結合臨床并加做如PAX-8、Tg等指標已排除甲狀腺乳頭狀癌可能。
細針抽吸標本中，有時候需要注意鑒別甲狀腺病變和甲狀旁腺病變，如甲狀旁腺腺瘤。如果可以做細胞塊，就可以加做免疫組化檢測，甲狀旁腺腺瘤為GATA-3、PTH陽性，而甲狀腺病變是TTF-1和Tg陽性。
用于甲狀腺乳頭狀癌發生機制及預測的研究
某些當前用于甲狀腺乳頭狀癌診斷的免疫組化指標，可能還有更多意義，具體如BRAF、galectin-3、TROP-2，詳述如下。
BRAF突變在甲狀腺乳頭狀癌的發生中具有關鍵作用，這一突變也和某些臨床病理特征相關，并對復發和死亡情況有預后意義。這些年，BRAF突變特異性蛋白已可通過免疫組化檢測，且已成為甲狀腺乳頭狀癌中BRAF突變的輔助檢測手段。有研究表明，免疫組化檢測BRAF突變的敏感性和特異性堪比直接測序、PCR檢測，且免疫組化方法費用低廉，因此可以用作甲狀腺乳頭狀癌診療中的一線預測標記。
甲狀腺乳頭狀癌中，還可通過免疫組化檢測galectin-3，尤其伴淋巴結轉移的病例中。甲狀腺乳頭狀癌患者血清中也可檢出該標記，可能可以作為分子影像學及腫瘤進展的標記。
TROP-2在很多癌中具有預后意義，尤其是乳腺癌和女性生殖道的癌以及甲狀腺乳頭狀癌。經典型甲狀腺乳頭狀癌中，p53過表達的情況并不常見，但這一現象可見于侵襲性表型的癌，且可作為局部淋巴結復發的預測標記。
VEGF是腫瘤血管生成的標記，也是腫瘤治療中血管生成抑制因子的靶點。對甲狀腺乳頭狀癌來說，VEGF涉及了腫瘤發生、與其他致病機制間有相互作用，也和侵襲性生物學行為有關，且可能可以作為靶向治療的靶點。
其他注意事項
免疫組化的原理是通過與目標蛋白結合的抗體而做相關檢測，相關標本制備的整個過程可能都會影響檢測過程，具體如標本固定、組織包埋、切片及撈片、脫蠟及水化、抗原修復、相關孵育、檢測方法等。目前，大部分步驟已經自動化。自動免疫組化染色的應用顯著減少了人力需求，且可以同時做多個抗體檢測。
大部分情況下，免疫組化是在石蠟包埋組織學切片中進行的，但有時候也需要在細胞塊中進行。對于甲狀腺病變來說，很多都是細針抽吸標本，因此細胞塊進行免疫組化檢測的情況也并不少見，此時需要注意結合臨床相關信息。此外，甲狀腺細針抽吸標本中容易出現大量血液，制作細胞塊及后續免疫組化檢測需注意。
免疫組化檢測已基本成為病理工作中的常規項目，但必須注意有質控及相關能力驗證。這方面內容需參考更多相關文獻，本文僅提供個別實例供欣賞。
圖5. 甲狀腺乳頭狀癌免疫組化，組織中既有甲狀腺乳頭狀癌、又有非癌的甲狀腺組織。免疫組化檢測的同時，需有相應HE切片供對比觀察：免疫組化BRAF檢測在癌組織為陽性表達，非癌組織無表達。
圖6. 免疫組化檢測的組織切片中需有對照。本例為甲狀腺癌免疫組化TTF-1檢測，腫瘤成分和非腫瘤成分均為陽性表達。左側為對照組織，其中包括了闌尾、肝臟、肺和小腸組織；其中肺組織中局灶有TTF-1的強陽性表達，可作為陽性內對照。
全文完
參考文獻
Lam AK, Lee KT. Application of Immunohistochemistry in Papillary Thyroid Carcinoma. Methods Mol Biol. 2022;2534:175-195.
doi:10.1007/978-1-0716-2505-7_13